欧宝体育app登录:《化学药品注射剂灭菌和无菌工艺研讨及验证辅导准则（试行）》全文

　　2020年12月31日，CDE正式发布《化学药品注射剂灭菌和无菌工艺研讨及验证辅导准则（试行）》，自发布之日起游览。

　　为促进化学药品注射剂的研讨和点评作业，在国家药品监督办理局的布置下，药审中心安排拟定了《化学药品注射剂灭菌和无菌工艺研讨及验证辅导准则（试行）》（见附件）。依据《国家药监局归纳司关于印发药品技能辅导准则发布程序的告诉》（药监综药管〔2020〕9号）要求，经国家药品监督办理局查看赞同，现予以发布，自发布之日起施行。

　　无菌药品是指法定药品标准中列有无菌查看项意图制剂和原料药，一般包含注射剂、无菌原料药及滴眼剂等。从严厉意义上讲，无菌药品应不含任何活的微生物，但因为现在查验手法的局限性，肯定无菌的概念不能适用于对整批产品的无菌性点评，因而现在所运用的“无菌”概念，是概率意义上的“无菌”。特定批次药品的无菌特性只能经过该批药品中活微生物存在的概率低至某个可承受的水平，即无菌确保水平（Sterility Assurance Level, SAL）来表征，而这种概率意义上的无菌需经过合理规划和全面验证的灭菌/除菌工艺进程、杰出的无菌确保体系以及在出产进程中严厉执行药品出产质量办理标准（GMP）予以确保。本辅导准则首要参阅国内外相关技能辅导准则和标准起草

　　拟定，要点对注射剂常用的灭菌/无菌工艺，即湿热灭菌为主的终究灭菌工艺（Terminal Sterilization Process）和无菌出产工艺

　　（Aseptic Process）的研讨和验证进行论述，旨在促进现阶段化学药品注射剂的研讨和点评作业的展开。本辅导准则首要适用于注射剂请求上市以及上市后改动等注册申报进程中对灭菌/无菌工艺进行的研讨和验证作业，相关仪器设备等的验证及惯例再验证不包含在本辅导准则的规模内。

　　本辅导准则的起草是依据对该问题的当时认知，跟着相关法规的不断完善以及药物研讨技能要求的进步，本技能攻略将 不断修订并完善。

　　灭菌工艺的挑选一般依照灭菌工艺挑选的决策树（详见附件 1）进行，湿热灭菌工艺是决策树中首要考虑的灭菌办法。湿热灭菌法系指将物品置于灭菌设备内运用饱满蒸汽、蒸汽-空气混合物、蒸汽-空气-水混合物、过热水等手法使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的办法。

　　注射剂的湿热灭菌工艺应首选过度杀灭法，即 F0（标准灭菌时刻）值大于等于 12 分钟的灭菌工艺；对热不安稳的药物， 可以挑选残存概率法，即 F0 值大于等于 8 分钟的灭菌工艺。假如 F0 值不能抵达 8 分钟，提示挑选湿热灭菌工艺不适合，需求考虑无菌出产工艺。

　　以上两种湿热灭菌工艺都可以在实践出产中运用，详细挑选哪种灭菌工艺，在很大程度上取决于产品的热安稳性。药物 是否能耐受湿热灭菌工艺，除了与药物活性成分的化学性质相 关外，还与制剂的处方、工艺、包装容器等密切相关，所以在初期的工艺规划进程中需求经过对药物热安稳性的归纳剖析来承认湿热灭菌工艺的可行性。

　　一般来说，需求经过各个方面的研讨，使药物尽或许地可以选用湿热灭菌工艺。只要在理论和实践均证明即便选用了各种可行的技能办法之后，药物活性成分仍然无法耐受湿热灭菌工艺时，才干挑选无菌出产工艺。任何商业上的考虑均不能作为不选用具有最高无菌确保水平的终究灭菌工艺的理由。

　　经过对药物活性成分的化学结构进行剖析，可以初步判断药物活性成分的安稳性，假如其结构中含有一些对热不安稳的化学基团，则提示该药物活性成分的热安稳性或许较差。在此根底之上，还应该经过规划一系列的强制降解实验对药物活性 成分的安稳性做进一步研讨承认，了解在各种条件下或许发生的降解反响，以便在处方工艺研讨中采纳针对性的办法，确保产品可以选用湿热灭菌工艺。关于一般降解杂质，不该只是因为其含量超越 ICHQ3A、Q3B 辅导准则规则的极限，就扫除湿热灭菌工艺而不进行证明，假如一般降解杂质确证为代谢产品或其含量水平已经过承认在可承受的规模内，仍引荐选用湿热灭菌工艺。

　　在对药物活性成分的化学结构特色与安稳性进行研讨的根底上，可以有针对性地进行处方工艺的优化研讨。例如选用充 氮工艺或在处方中参加适合的抗氧化剂来削减氧化杂质的发生；挑选利于药物活性成分安稳的 pH 值规模、溶剂体系、辅料等；经过灭菌时刻和灭菌温度的调整来挑选药物活性成分可以耐受 的湿热灭菌工艺条件等。

　　注射剂包装体系的挑选和规划也是或许影响湿热灭菌工艺条件挑选和终究无菌确保水平的重要要素。研讨中需求结合产品特性、包装体系的相容性、以及灭菌器的灭菌原理等，对包装体系的品种、性状、尺度进行挑选，确保所选的灭菌工艺条件不会对包装体系的密封性和相容性发生晦气的影响，如包装体系的变形、决裂，或许浸出物超越可承受的水相等。应该留意的是， 运用热不安稳的包装体系不能作为挑选无菌工艺的理由。

　　不管运用何种规划办法，都需求进行终究灭菌产品的安稳性研讨。查询终究灭菌工艺对产品安稳性影响的目标可包含有 关物质、含量、pH 值、色彩以及产品的其它要害质量特色。

　　灭菌时，微生物的杀灭作用和药物活性成分的降解程度都是温度和时刻累积作用的成果。这意味着加热和冷却进程的变 化也或许影响微生物的杀灭作用和产品的安稳性。因而，安稳性研讨用样品最好选取处于最严苛灭菌条件下的产品，如可选取在热穿透实验中 F0 最大或灭菌参数值（最高答应灭菌温度和

　　/或最长灭菌时刻）最大方位处的灭菌产品进行安稳性查询，以确保产品的质量在有用期内仍能契合要求。

　　拷贝注射剂挑选的灭菌/除菌工艺，应能确保其无菌确保水平不低于参比制剂。假如参比制剂选用了无菌出产工艺，若拷贝注射剂对其处方组成合理性、灭菌工艺发生的降解杂质等危险要素进行了全面的证明之后，也应依照灭菌工艺挑选的决策树（详见附件 1）进行灭菌工艺的挑选。

　　湿热灭菌工艺的灭菌温度和时刻一般会对微生物，特别耐受性较大的微生物的杀灭作用发生影响。过度杀灭法假定的微生物负荷和耐受性都高于实践情况，理论上能完全杀灭微生物， 足以满意无菌确保水平的要求，故没有必要对每一批次产品进行灭菌前微生物污染水平的监控。从操控热原的视点，主张依照药品 GMP 办理，以恰当的频次对微生物污染水平进行监测。

　　与过度杀灭法比较，残存概率法的热能较低，为不下降产品的无菌确保水平，除了需求对灭菌进程自身进行严厉的操控以外，还需求经过合理的工艺规划来下降微生物污染，并选用恰当的办法对微生物污染水平缓耐受性进行监测。

　　在出产工艺各环节引进微生物的危险点评根底上，一般考虑选用药液过滤、药液寄存时限操控等办法来下降注射剂灭菌前的微生物污染。尽管药液过滤在终究灭菌产品的出产中只是作为辅佐的操控手法，可是在工艺研讨进程中，也应该对滤膜的孔径、原料、运用周期等根本性质进行必要的挑选和验证，并在工艺操作中进行相应的规则。药液在制备、分装进程中易引起微生物繁衍，特别一些养分型的注射剂，因而应经过必要的查询和验证来承认药液制造至过滤前、以及过滤、灌装后至灭菌前可以放置的最长时限，并相应承认产品的批量和出产周期。

　　灭菌前微生物污染水平监测的取样应掩盖正常出产的整个进程，应依据危险点评选取最有代表性的样品，且要充沛考虑 到产品从灌装到灭菌前的放置时刻。假如灌装需求继续一段时 间，一般从每批产品灌装开端、中心及结束时别离取样，也可根 据危险点评成果选取适合的取样点进行取样。灭菌前微生物污 染水平的监测办法应经过验证，详细操作可参照《我国药典》2020 年版四部公例 1105“微生物计数法”和 1106“操控菌查看法”。

　　关于残存概率法灭菌前微生物污染水平监测中发现有污染菌的产品，应选用适合的办法进行污染菌的耐受性查看。一般 来说，生物指示剂的耐受性用 DT 值（耐热参数）来表明。耐受性查看中任何幸存下来或成长的微生物都可以被假定为耐热菌， 一般选用守时煮沸法将其与已知的生物指示剂的耐受性加以比 较，必要时，可进一步测验耐热污染菌的 DT 值，DT 值的测定可以参阅《我国药典》2020 年版四部公例 9208“生物指示剂耐受性查看法辅导准则”进行，然后依据灭菌的 F0 值、污染菌的数量与耐受性对产品的无菌性做出点评。当产品微生物污染水平超越极限时，应对污染菌进行辨别，查询污染菌的来历并选用相 应的纠正办法。

　　湿热灭菌工艺的验证一般分为物理承认和生物学承认两部分，物理承认包含热散布实验、热穿透实验等，生物学承认首要是微生物应战实验。物理承认和生物学承认成果应共同，两者 不能彼此代替。

　　物理承认所用的温度测验体系应在验证和/或实验前、后进行校准，校准的频次应依据仪器设备的功能、验证继续的时刻长短来承认。物理承认所触及的灭菌设备，应该在灭菌工艺验证前已经过设备承认。

　　假如在施行灭菌工艺验证前已经在包含拟验证工艺条件下完结了空载热散布实验，且在验证合格期限内，准则上可以引 用相关数据和定论。

　　装载热散布实验的意图是在拟选用的装载办法下，查询产品装载区内实践取得的灭菌条件与规划的灭菌周期工艺参数的契合性。了解装载区内的温度散布情况，包含高温点（热门）、低温点（冷点）的方位，为后续的点评和验证供给科学依据。装载热散布一般在空载热散布的根底上进行。温度探头的个数和装置方位应归纳灭菌器的几许形状、空腔尺度、产品摆放办法以及空载热散布承认的成果等要素承认，且至少应包含空载热散布测验取得的高温点、低温点，灭菌器自身温度测验探头部位等特别方位。温度探头在该阶段测验中应固定，且安放在待灭菌容器的周围，留意不能触摸待灭菌容器或十分挨近灭菌器内壁。

　　装载热散布实验需求考虑最大、最小和出产进程中典型装载量情况，实验时应尽或许运用待灭菌产品。假如选用类似物， 应结合产品的热力学性质等进行恰当的危险点评。待灭菌产品

　　的装载办法和灭菌工艺等各项参数的设定应与正常出产时共同， 应选用适合的办法（图表或相片）描绘产品的装载办法，并点评探头放置是否合理。每一装载办法的热散布实验需求至少接连 进行三次。

　　热穿透实验用于查询灭菌器和灭菌程序对待灭菌产品的适用性，意图是承认产品内部也能抵达预订的灭菌温度、灭菌时刻或 F0 值。一个好的灭菌器和灭菌程序，既要使一切待灭菌产品抵达必定的 F0 值，以确保产品的 SAL≤10－6，一起又不能使部分产品受热过度而形成产品中活性成分的降解，导致同一灭菌批次的产品呈现质量不均一。

　　热穿透实验的温度探头的个数和装置方位可参阅装载热散布设置，装置方位的承认应依据危险点评的准则，包含热散布 实验承认的和其他或许的高温点和低温点、灭菌器温度探头附 近、产品温度记载探头处等。除要求选用满足数量的温度探头 外，还应将热穿透温度探头置于药液中最难或最迟抵达灭菌温 度的点、或 F0 值最低的点，即整个包装中最难灭菌的方位。关于小容量注射液，假如有数据支撑或有依据表明将探头放在产 品包装之外也可以反映出产品的灭菌程度，危险可以充沛得到 操控，也可以考虑将探头放在容器之外。

　　热穿透实验的进程及要求与装载热散布实验根本相同，每 一装载办法的热穿透实验也需求至少进行三次。经过热穿透实验可以承认在设定的灭菌程序下，灭菌器内各个方位的待灭菌产品是否可以抵达设定的灭菌温度、灭菌时刻或 F0 值。再结合灭菌前微生物污染水平的检测，可以承认灭菌器内各个方位的待灭菌产品是否可以抵达预期的无菌确保水平。

　　关于 F0 值最大点方位的样品，因为其受热情况最为激烈， 因而应点评该方位产品的安稳性情况，以进一步承认灭菌关于产品的安稳性没有影响。

　　在物理承认实验中，应承认要害和重要的运转参数并有相 应的文件和记载。需求重视的首要参数或许包含：

　　以上参数的合格标准应结合灭菌条件、灭菌设备的特色以及产品的实践情况拟定。一般情况下，热散布实验的保温阶段内温度动摇应在±1.0℃之内，升、降温进程的温度动摇可经过整体 F0 值来反映。假如温度或 F0 值不同超越可承受规模（需求依据设备、产品等实践情况，依据危险点评拟定科学合理的承受规模），提示灭菌器的功能不契合要求、装载办法挑选不妥等，需求寻觅原因并进行改善，从头进行验证。别的关于热灵敏的药物，还应该操控灭菌器的升温文降温时刻，以确保输入的热能操控在合理的规模内，不会对产品的热安稳性形成影响。

　　湿热灭菌工艺的微生物应战实验是指将必定量已知 DT 值的耐热芽孢（生物指示剂）在设定的湿热灭菌条件下进行灭菌， 以验证设定的灭菌工艺是否的确能使产品抵达预订的无菌确保水平。生物指示剂被杀灭的程度，是点评一个灭菌程序有用性的直观目标。

　　9207“灭菌用生物指示剂辅导准则”。针对详细的灭菌工艺和详细的产品，还应留意所用的生物指示剂的耐受性应强于待灭菌 产品中的污染菌。

　　湿热灭菌工艺常用的生物指示剂有以下几种，嗜热脂肪地芽孢杆菌，生孢梭菌、枯草芽孢杆菌等。关于选用过度杀灭法的灭菌程序，生物指示剂体系首要是嗜热脂肪地芽孢杆菌的芽孢， 或其他 D121°C 值大于 1 分钟的芽孢。残存概率法因为其热输入量比较低，因而在验证中运用的生物指示剂的耐受功可以小于嗜热脂肪地芽孢杆菌。

　　实践验证进程中可以将生物指示剂接种到待灭菌产品中或直接运用市售的生物指示剂制品。因为生物指示剂在不同介质或环境中的耐受性会有所不同，所以不管是将生物指示剂接种到待灭菌产品的办法，或直接运用市售的生物指示剂制品，均应考虑待灭菌产品对细菌芽孢耐受性的影响，假如待灭菌产品会使芽孢的耐受性添加，应选用直接接种到待灭菌产品的办法。假如生物指示剂与产品不相容，可以用与产品类似的溶液来代替产品。运用市售生物指示剂时，应确保生物指示剂的 DT 值和总芽孢数等首要质量参数的准确性。

　　生物指示剂的接种量（即初始芽孢数）需求依据生物指示剂在待灭菌样品中的耐受性和灭菌工艺条件来承认，应契合应战性实验的要求。生物指示剂的接种量可用附件 2 的办法核算。生物指示剂的数量和放置方位应归纳灭菌器的几许形状、

　　空腔尺度、产品的装载办法以及热散布承认的成果等要素承认， 且在灭菌设备的冷点处必需放置生物指示剂。装有生物指示剂的容器应紧邻于装有测温探头的容器，直接接种供试品宜放置在热穿透实验产品的紧邻方位，灭菌器的其他部位应装载产品或许类似物，以尽或许的仿照实践出产时的情况。

　　生物指示剂应战实验应该依照产品设定的灭菌工艺进行灭菌。每个产品的每一灭菌程序，至少需求接连进行三次生物指 示剂应战实验。

　　可以依据生物指示剂的成长特性以及验证时的接种办法， 选用恰当的办法进行查看和培育。完结灭菌后，尽快将应战指 示剂放入培育基中进行培育。需求留意不同的生物指示剂所需 要的培育条件也各不相同，主张参照所用生物指示剂的特性和 供货商的阐明书来挑选培育条件，一起应放置阳性对照品和阴 性对照品。

　　依据生物指示剂的 DT 值、接种量以及应战实验验证成果，结合产品灭菌前微生物的污染水平（耐受性及微生物污染数量） 来点评产品在验证的灭菌条件下实践抵达的 SAL 值。假如验证成果呈现不合格，需求剖析原因，采纳相应的改善办法后从头进行验证作业。

　　湿热灭菌工艺验证时，如存在不同灭菌器（一般指相同作业和规划原理的灭菌器）、处方组成、容器标准、装量、装载办法等情况。在不献身无菌确保水平的前提下，为削减验证明验数量，下降验证本钱，可归纳各方面要素考虑，在危险点评的根底上，经过充沛的合理性证明，选用具有代表性的灭菌器、待灭菌产品和装载办法等进行灭菌工艺验证，可不用对一切情况进行 验证。

　　注射剂应首选终端灭菌工艺。如经充沛的研讨（包含处方工艺研讨、质量操控研讨等）证明产品无法耐受终端灭菌工艺，则可考虑能否经过除菌过滤工艺进行过滤除菌，假如可以，可选用包含除菌过滤的无菌工艺；假如不可以，则可考虑选用无菌分装的全无菌工艺。

　　除菌过滤是指选用物理截留的办法去除液体中的微生物， 以抵达无菌药品相关质量要求的进程。选用除菌过滤工艺时， 工艺研讨和出产进程操控的要点是影响无菌确保水平的工艺步 骤和工艺参数，首要包含物料（如原料药、辅料、内包装材料等） 的质量操控、除菌过滤体系的规划及挑选、除菌过滤工艺参数 的研讨、除菌过滤出产进程的操控等。

　　一般，除菌级过滤器在工艺条件下每平方厘米有用过滤面积可以截留≥107CFU（colony forming unit，集落/菌落形成单位） 的缺点短波单胞菌（Brevundimonas diminuta，曾用名：缺点假单胞菌）。除菌过滤工艺一般选用 0.22μm（更小孔径或相同过滤效能）的除菌级过滤器。

　　应尽或许采纳办法下降除菌过滤的危险，例如：①宜装置第二只已灭菌的除菌过滤器，终究的除菌过滤器应当尽或许挨近灌点缀；②因为微生物经过除菌过滤器的概率跟着待过滤药液中微生物数量的添加而添加，终究除菌过滤前，待过滤药液的微生物负荷一般小于等于 10cfu/100ml；③应经过研讨承认药液制造后至过滤前的寄存时刻、药液过滤操作的时刻、过滤后至灌装前放置的时刻等工艺时限。

　　除菌过滤器的除菌过滤效能是点评除菌过滤工艺的重要参数，需求进行相应的研讨和验证。一般，影响除菌过滤器的除菌过滤效能的要素包含：①药液的性质，如药液的粘度、表面张力、pH 值、渗透压等；②过滤进程的工艺参数，如过滤的压力、流速、时刻、温度等；③除菌过滤器与所过滤的药液的彼此作用， 如除菌过滤器与药液的相容性；④除菌过滤器预处理、过滤总量和运用周期等。除菌过滤器的过滤效能可因产品和操作条件不同而不同，滤器的挑选及工艺参数的研讨应考虑上述要素。

　　无菌分装工艺是指灭菌/除菌工艺处理后的原料药或许原料药和辅料，用无菌操作的办法分装到灭菌后的容器中再进行密封的出产工艺。无菌分装工艺的工艺研讨和出产进程操控的要点同样是影响无菌确保水平的工艺进程，首要包含物料（原料药、辅料、内包装材料等）的质量操控、物料露出于环境中或许再污染的操作进程等。

　　关于物料的质量操控，选用无菌分装工艺的制剂所触及的一切物料，都有必要选用恰当的灭菌/除菌工艺处理后方可运用。各物料的灭菌/除菌工艺，都应经过验证、进行监测，并遭到杰出的操控。一起需求对各物料的无菌性、细菌内毒素水相等进行严厉操控，经过研讨承认相应的质控标准。

　　原料药或许原料药和辅料的分装进程是影响产品质量和无 菌确保水平的要害出产进程，应结合出产设备和产品特色进行工艺参数（如分装速度和分装时刻等）的研讨，并承认相应的工艺操控标准。

　　无菌出产工艺验证首要包含除菌过滤工艺验证及无菌工艺模仿实验。选用除菌过滤工艺的产品应进行除菌过滤工艺验证 及无菌工艺模仿实验，选用无菌分装工艺的产品应进行无菌工 艺模仿实验。

　　除菌过滤工艺验证一般包含细菌截留实验、化学兼容性实验、可提取物或浸出物实验、安全性点评和吸附点评等内容。应结合产品特色及实践过滤工艺中的最差条件，对相关验证明验 进行合理规划，详细验证操作（如细菌截留实验中应战用微生物的挑选、滤膜的要求，可提取物和浸出物实验中的危险点评、提取办法、检测办法及安全性点评，化学兼容性实验中应要点查询的目标，吸附实验的实验条件等）可参照《除菌过滤技能及运用攻略》及《化学药品注射剂出产所用的塑料组件体系相容性研讨技能攻略》相关内容进行。其间，结合产品特色，还应重视的内容如下：

　　药品和/或工艺条件自身或许会影响应战微生物的存生机，因而在进行细菌截留实验之前，需求承认应战微生物于工艺条件下在药品中的存活情况（生存性实验/活度实验），以承认合理的细菌应战办法。关于非灭菌性/非抑菌性的药液，直接在药液中接种测验微生物是测验除菌级过滤器（滤膜）细菌截留才能的首选办法；关于抑菌的/灭菌的药液，可选用修正工艺（如调整温度）、修正测验液配方（调整 pH 值、去除灭菌成分或运用产品的代替溶液）等办法对过滤器（滤膜）进行预处理后再进行细菌应战实验。假如运用代替溶液进行实验，需求供给合理的数据和解说。关于同一族产品，即具有相同组分而不同浓度的产品，可以用应战极限浓度的办法进行验证，代替性地承受中心的浓度。

　　过滤温度、过滤时刻、过滤批量和压差或流速等会影响细菌截留实验的成果。主张对实践出产的过滤工艺进行一次完全点评，包含溶剂性质（例如水性的、酸、碱、有机的）、过滤时刻、工艺压差、工艺流速、工艺温度、过滤批量和过滤体系规划标准， 以便合理规划微生物截留实验条件。假如细菌截留验证研讨中， 在过滤器的下流检测到测验用微生物，则应进行查询。假如查询承认测验用微生物能穿透完整性检测合格的过滤器，那么就应从头考虑此种过滤器在这些作业条件下的适用性。

　　完整性测验贯穿于细菌截留实验以及化学兼容性实验，除此之外，在药品接连三批出产工艺验证及惯例出产进程中也触及完整性测验。应清晰过滤器运用后完整性测验的潮湿介质（包含水、醇类溶液等标准介质或药液），假如选用的潮湿介质为药液，则应进行产品相关完整性标准的验证以支撑该标准的承认。关于冗余过滤，运用后应先对主过滤器进行完整性测验，假如主过滤器完整性测验经过，则冗余过滤器不需求进行完整性测验；假如主过滤器完整性测验失利，则需求对冗余过滤器进行完整性测验。关于经过验证需求一系列（两个或以上）的除菌级过滤器的除菌单元，在运用后有必要悉数经过完整性测验。

　　过滤器的重复运用关于制药进程来说是不被引荐的，如在实践作业中存在重复运用的情况，应进行充沛的危险点评，包 括细菌的穿透、过滤器完整性缺点、可提取物的改动、清洗办法对产品内各组分清洗的适用性、产品存在的残留（或组分经灭 菌后的衍生物）对下一批次产品质量危险的影响、过滤器过早 阻塞、过滤器组件老化引起的功能改动等，并供给充沛的验证 和数据支撑。

　　减菌过滤通惯例划在终端灭菌工艺出产的无菌制剂的灌装前端，或非终究灭菌工艺出产的无菌制剂的除菌过滤工序前端。一般选用 0.45μm 或 0.22μm（及以下）孔径的过滤器。针对减菌过滤应进行的验证包含化学兼容性、可提取物/浸出物及吸附实验等。

　　无菌工艺模仿实验是指选用恰当的培育基或其他介质，模仿制剂出产中无菌操作的全进程，点评该工艺无菌确保水平的一系列活动。应结合产品特色及实践工艺中的最差条件，对相关验证明验进行合理规划，详细验证操作，包含模仿介质的挑选与点评（培育基、其他介质）、灌装数量及容器的装量、最差条件的挑选、培育办法、成果点评等，可参照《无菌工艺模仿实验攻略（无菌制剂）》相关内容进行。一起，应要点重视以下内容：

　　应结合产品实践出产工艺，点评模仿实验规划的最差条件 及干涉操作是否可以包含实践出产进程中或许发生的情况。

　　最差条件并不是指人为发明的超出答应规模的出产情况和环境。为了承认无菌工艺危险操控的有用性，应经过危险点评 并结合无菌出产工艺、设备配备水平、人员数量和干涉等要从来规划模仿实验最差条件。包含但不限于以下方面：1）人员：应充沛考虑人员及其活动对无菌出产工艺带来的危险。如模仿出产进程的最多人数，当操作人员数量削减或许导致其他方面污染危险添加时，则此类条件也视为最差条件之一。参加人员应包含日常参加到无菌出产的悉数人员，如出产操作、取样、环境监测和设备设备保护人员，一起应考虑以上人员穿插作业、班次轮换、更衣、夜班疲惫状况等要素。2）时限：在条件答应的情况下，恰当考虑模仿实践出产操作进程中房间、设备、物料消毒或灭菌后放置的最长时刻及最长的工艺保存时限等，如设备设备、分装容器、无菌用具灭菌后最长的放置时刻等。3）灌装速度/分装速度：模仿实验应包含产品实践灌装速度规模，依据无菌危险的视点剖析点评灌装速度对工艺进程及其他方面的影响程度。例如选用最慢的灌装速度、最大的容器用以模仿最长露出时刻；或选用最快的灌装速度、最小的容器时，用以模仿最大操作强度/难度。4）环境：无菌工艺模仿实验期间环境的消毒处理应依据正常出产期间的消毒办法进行，防止过度消毒及消毒剂的过度运用。

　　干涉是指由操作人员依照相关规则参加无菌工艺出产的一切操作活动。干涉可分为固有干涉和纠正性干涉。固有干涉是 指惯例和有方案的无菌操作，如装载胶塞、环境监控、设备装置等；纠正性干涉是指对无菌出产进程的纠正或调整，如出产过 程中替换部件、设备毛病扫除等。

　　注射用冻干粉末的无菌工艺模仿实验还包含冻干进程的进箱、冻干、出箱操作（冷冻或许会按捺微生物成长，一般不模仿冷冻进程），一般情况下可选用缩短保持时刻形式，即培育基灌装到容器中，半压塞后将容器转移至冻干机内部分抽真空，维 持时刻短于实践冻干周期，然后箱体破空（可依据产品特性设 计破空次数）后进行压塞。

　　注射用无菌粉末其分装所用的出产线与惯例液体灌装线不同，进行无菌工艺模仿实验时需求将培育基及模仿介质均灌装入容器中，模仿办法一般包含：运用无菌粉末分装设备将液体培育基和模仿介质进行一步灌装；加装特别设备灌装液体培育基；先在线灌装无菌液体培育基到容器中，然后再在出产线上进行无菌粉末的分装模仿；先在出产线上进行无菌粉末的分装， 然后再灌装无菌液体培育基到容器中；或其他办法。应依据详细情况规划培育基灌装工艺，并充沛阐明规划的合理性。

　　附件 2：生物指示剂的接种量（即初始芽孢数）的核算办法依据公式：lgN0= F(T,z) / DT+lgNT

　　公式中，F(T,z)——在规则的温度系数（z 值）下，灭菌工艺希望取得的温度 T/℃下的等效灭菌时刻，min；

　　DT——生物指示剂在温度 T/℃下的耐热参数，min；N0——灭菌前生物指示剂的初始芽孢数；

　　一般在灭菌验证时，要求灭菌后一切生物指示剂为阴性成果（即悉数杀灭），则 NT 实践可以抵达 10-1~10-2，乃至更低。可是，为了添加灭菌确保的安全边沿，一般取 NT=1，即 lgNT =0。以上公式中，当生物指示剂承认后，其 DT 可承认，灭菌工艺承认后，所希望的灭菌值 F(T,z)可承认，lgNT 取 0，则可核算 N0。特别情况下，若选取 NT＜1 核算N0，应供给合理性阐明。

　　[3] 药品出产质量办理标准（2010 年修订）（卫生部令第 79 号）